服务与解决方案
送样要求
SeekOneDD
单细胞3'转录组测序解决方案
服务流程
组织样本解离
单细胞分离标记
文库构建
数据分析
高通量测序
组织
≥200 mg
(黄豆粒大小)
新鲜组织样本
穿刺样本
≥3条
新鲜穿刺样本
湿冰
4~6 mL
无严重溶血
新鲜血液
冻存PBMC
细胞量不低于
100万个
冻存前需完成红细胞裂解
保证细胞活率>90%
冻存时使用冻存盒梯度降温冻存
-80℃,
干冰运输
2-8℃
2-8℃
置于组织保存液
单细胞悬液
生信分析
测序数据过滤
与质量评估
单细胞数据质控分析
UMI统计
基因组比对
基因检测数统计
有效细胞数统计
基因表达定量
定制化分析
定制化部分结果展示
样本数量
应用案例
案例一:肺肿瘤微环境中基质细胞的表型塑造
SeekOneDD (Digital Droplet) 单细胞3’转录组测序采用寻因生物自主研发的高通量单细胞转录组建库试剂盒进行文库构建。该试剂盒需配合本公司自主研发的SeekOneDigital Droplet System(SeekOne数字液滴仪,简称SeekOneDD)完成单细胞分离、标记及核酸标记、捕获, 最终构建出兼容Illumina测序仪和华大测序仪的高通量单细胞转录组文库进行测序,随后进行一系列生信分析。
样本类型
样本量
接收标准
运输条件
备注
浓度:
400-1000 cells/μL
体积:>100 μL
细胞活性:>90%
结团率:<5%
有核率:>70%
细胞直径范围: 5~30 μm
4℃
建议液体体积充满1.5ml保存管,避免运输途中震荡起泡
体液
体液内活细胞
数量≥10万个
新鲜体液
湿冰
此处体液类样品包括但不限于:尿液、胸水、腹水、灌洗液、脑积液等
细胞图谱构建
数据降维PCA分析
细胞聚类UMAP/tSNE分析
Cell type注释
差异表达分析
marker基因Violin图分析
marker基因t-SNE图分析
marker基因heatmap图分析
组织/样本cell type差异分析
功能注释与分析
GO/KEGG功能富集分析
Reactome功能富集分析
蛋白互作网络分析
marker基因TF注释
细胞分群
进化
细胞通讯
突变
功能
联合分析
细胞再聚类
细胞亚群手动注释
拟时序分析
Monocla/Scanpy
/Pseudotime选一
RNA速率分析
配体受体分析
inferCNV分析
SNP分析
GSEA/GSVA富集分析
WGCNA分析
选择数据差异富集分析
scDOSE基因和
疾病富集注释(人)
SCENIC分析
TCGA联合分析
Bulk RNA联合分析
细胞通讯分析
拟时序分析
GSVA基因富集变异分析
案例二:单细胞水平描绘系统性红斑狼疮的异质性
案例三:绘制人类垂体发育的转录景观图谱
产品优势
兼容
灵活
兼容细胞直径5~40 μm的不同类型的真核细胞
兼容标准通量(500~12,000)和超高通量(500~24,000)芯片
兼容多种产品管线
单次操作可同时运行1~8个样本,单样本可捕获500~12,000个细胞
单样本单通道,杜绝芯片浪费
准确
高效
机时短,3 分钟快速生成15万个油包水液滴,细胞高保真,数据更准确
双细胞率低约0.3%(捕获1,000个细胞)
双算法判定细胞,数据分析更准确
单细胞捕获效率高达65%
自动温控系统,消除环境温差影响,油包水液滴生成更稳定