服务与解决方案
送样要求
SeekOneMM
大孔径高通量单细胞转录组测序解决方案
服务流程
组织样本解离
单细胞分离标记
文库构建
数据分析
高通量测序
样本通量灵活(单人操作可同时处理1~4个样本)
无需配备昂贵仪器
灵活
组织
≥200 mg
(黄豆粒大小)
新鲜组织样本
穿刺样本
≥3条
新鲜穿刺样本
湿冰
4~6 mL
无严重溶血
新鲜血液
冻存PBMC
细胞量不低于
100万个
冻存前需完成红细胞裂解
保证细胞活率>90%
冻存时使用冻存盒梯度降温冻存
-80℃,
干冰运输
2-8℃
2-8℃
置于组织保存液
单细胞悬液
生信分析
测序数据过滤
与质量评估
单细胞数据质控分析
UMI统计
基因组比对
基因检测数统计
有效细胞数统计
基因表达定量
定制化分析
定制化部分结果展示
样本数量
应用案例
案例一:肺肿瘤微环境中基质细胞的表型塑造
常见问题
SeekOne单细胞转录组构建的测序文库适用的测序平台有哪些?
该文库目前适用于Illumina高通量测序平台,如使用华大智造的MGISQ测序平台,则需在测序前对文库进行环化。
SeekOneMM(Microwell&MagneticBeads) 大孔径高通量单细胞转录组测序是采用寻因生物自主研发的SeekOneMM 大孔径高通量单细胞转录组试剂盒进行单细胞转录组建库,该试剂盒无需配套昂贵仪器,通过微孔芯片(SeekOneChip)和核酸标记磁珠(Barcoded Beads)即可实现单细胞的捕获、标记。最终构建出兼容Illumina 测序仪的高通量单细胞转录组文库进行测序,随后进行一系列生信分析。
服务优势
精准
双细胞率低于0.7%
双标系统同时标记细胞及mRNA分子
数据分析软件准确度高
高效
单细胞捕获效率高达60%
2小时即可完成单细胞捕获与逆转录
解离经验丰富
数十种物种、百余种组织类型的解离实战经验
样本类型
样本量
接收标准
运输条件
备注
浓度:
400-1000 cells/μL
体积:>100 μL
细胞活性:>90%
结团率:<5%
有核率:>70%
细胞直径范围:10-70 μm圆形细胞及≤100 μm长形细胞
4℃
建议液体体积充满1.5ml保存管,避免运输途中震荡起泡
体液
体液内活细胞
数量≥10万个
新鲜体液
湿冰
此处体液类样品包括但不限于:尿液、胸水、腹水、灌洗液、脑积液等
细胞图谱构建
数据降维PCA分析
细胞聚类UMAP/tSNE分析
Cell type注释
差异表达分析
marker基因Violin图分析
marker基因t-SNE图分析
marker基因heatmap图分析
组织/样本cell type差异分析
功能注释与分析
GO/KEGG功能富集分析
Reactome功能富集分析
蛋白互作网络分析
marker基因TF注释
细胞分群
进化
细胞通讯
突变
功能
联合分析
细胞再聚类
细胞亚群手动注释
拟时序分析
Monocla/Scanpy
/Pseudotime选一
RNA速率分析
配体受体分析
inferCNV分析
SNP分析
GSEA/GSVA富集分析
WGCNA分析
选择数据差异富集分析
scDOSE基因和
疾病富集注释(人)
SCENIC分析
TCGA联合分析
Bulk RNA联合分析
细胞通讯分析
拟时序分析
GSVA基因富集变异分析
案例二:单细胞水平描绘系统性红斑狼疮的异质性
案例三:绘制人类垂体发育的转录景观图谱